 اب ہم اس نیم عرول کی اپتدہ کر رہے ہیں جو انسٹرومنٹیشن کے ساتھ ہے اور اس کے پہلے ورژن میں ہم کرومٹوگرافی کو دیسکس کریں گے کرومٹوگرافک ٹیکنیک، بے شمار ٹیکنیکس، ہمارے انٹیکل کمیسٹری کے اندر مختلف کمپاومس کو سپرٹ کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہیں کرومٹوگرافی بیسی کے لیے ایک فیزیکل سیپریشن مطرد ہے کہ ہم دو سولوانٹس کے درمیان تو امیس بل لکوٹس کے درمیان یا لکوٹ اور سولیٹ سرفیسس کے درمیان ہم علغلک کرتے ہیں اپنے انہلائٹ کو یا ایک خاص کمپاوم کو کرومٹوگرافی can be used to identify drugs جو فرمسرکل اندسٹری میں استعمال ہوتی ہیں بازوقات پینٹس بازوقات ڈائز یا انک کو سپرٹ کر کے مختلف کلرز میں ڈسٹریبوٹ کر کے دیکھنے کی ضرورت ہوتی ہیں تو کرومٹوگرافی اس میں بھی استعمال ہو سکتی ہیں اس طرح پیسٹری سائر ڈیزیڈیو انالیسز یا فلیٹوکسنز یا بہت سارے اور مانوٹ کونسچنٹس جو ٹریس حالت میں یا بہت تھوڑی کونٹرٹی کے اندر انہلائٹ کے طور پہ موجود ہیں وارٹر میں امپیوریٹیز کے طور پہ یا ویڈیٹیوبرز میں ان کو بھی ہم کرومٹوگرافی کتنیک کے ذریعے سپرٹ کر سکتے ہیں سپریشن is determined by molecular size اور by chemistry by charges بہت ساری فینامنا جس میں مختلف تیکنیکس میں مختلف کونسپٹ استعمال کرتے ہیں اور چارجز کی بیسس پہ یا ان کے سائزز کی بیسس پہ مالیکول کو علک کیا جاتا ہے کرومٹوگرافی کسی بھی نام سے اور کوئی بھی تیکنیک ہو دو چیزیں ہر ایک اندر سیمیلاریٹیز ملیں گی آپ کو ایک سٹریشنری فیز اور ایک مبایل فیز سٹریشنری فیز جسے ہم absorbent کہہ رہے ہیں اور solid form میں absorbent بھی کہہ رہے ہیں یہ وہ مطیریل ہے جس پر سپریشن ہو رہی ہے جو سپریٹ کرنے کے لیے استعمال ہو رہے ہیں یہ solid بھی ہو سکتا ہے کوئی جل یا بازقات لکوٹ بھی ہوتا ہے اسے matrix بھی کہہ سکتے ہیں یہ beads یا رزنس کی form میں بھی ہوتا ہے آپ لوگ نے پیبر کے اوپر یا filter پیبر پر اگر ایک ink drop لگا کر پانی گرنے کی بجہ سے اپنی copy کے اوپر بھی ink کو پھلتے وزور دیکھا ہوگا یہ آپزرویشن جہاں پر پیبر as a matrix use ہو رہا ہے اور اس کے اندر موجود water particles جو binded water particle تھے وہ سپریشن کرنے میں helpful ہو رہے ہیں اور وہ ink drop مختلف colors کے اندر dyspers ہو جاتا ہے مبائل فیز وہ liquid جسے اگر پانی گر گیا ہے تو یہ پانی اس کو پھلانے کا کام کر رہا ہے اس کو مبائل فیز کہہ سکتے ہیں مبائل فیز is a solvent transport to the sample and is usually a liquid باز وقاد یہ گیاس کے طور پہ بھی استعمال ہوتا ہے جسے گیاس کرمڈگرافی میں liquid استعمال ہوتا ہے liquid کرمڈگرافی میں hplc میں column کرمڈگرافی میں اسے eluting buffers بھی کہتے ہیں جب آپ buffers کو استعمال کر رہے ہیں the compounds جن کو سپریٹ کرنا چاہر ہیں وہ solutes کہلاتے ہیں کہ جو solution کے اندر solubles ہیں اور solubles solution میں سے ہمیں disperse کر کے علک کرنے کی کوشش کرتے ہیں مبائل فیزیز کی بیسس پر اگر کرمڈگرافی کی مختلف تیکنیکز کو سمجھا جائے تو liquid مبائل فیز use کرتے ہوئے liquid liquid کرمڈگرافی بھی ہوتی ہے جسے ہم partitioning بھی کہتے ہیں یا partitioning کرمڈگرافی بھی کہتے ہیں liquid میں پہلا liquid مبائل فیز کو رپریزن کر رہا ہے جبکہ liquid stationing فیز کو رپریزن کر رہا ہے یعنی liquid ہی ہماری مبائل فیز ہے اور liquid ہی stationing فیز ہے تو partitioning کہلائے گی normal phase یا reverse phase یہ اور terminologies ہیں جب ہم polar silica یا polar adsorbent استعمال کر رہے ہیں اور non polar mobile phases استعمال کر رہے ہیں تو اسے ہم normal phase کہتے ہیں vice versa جب ہم polar mobile phase استعمال کریں یا سے water acetonitrile methanol یا buffers تو اور ہماری stationing فیز وہ non polar ہو تو اسے reverse phase کرمڈگرافی کہتے ہیں اس طرح liquid solid کرمڈگرافی جس میں liquid ہمارے مبائل فیز ہے اور solid stationing فیز ہے اسے adsorption کرمڈگرافی بھی کہتے ہیں liquid liquid کی طرح یہ بھی normal phase اور reverse phase دانو فرمڈ میں استعمال ہوتی liquid kermitگرافی یا gas kermitگرافی اگر liquid mobile phase استعمال کر رہے ہیں تو liquid kermitگرافی اگر gas as a mobile phase استعمال کر رہے ہیں تو gas kermitگرافی gas کے ساتھ اگر stationing فیز liquid ہے تو gas liquid اگر stationing فیز solid ہے تو gas solid اسے gc عم طور پہ گیتے ہیں gas kermitگرافی جسے gas solid یا gas liquid کی form میں استعمال کرتے ہیں liquid kermitگرافی کی ایک سے زادہ forms ہے جس طرح paper kermitگرافی اسے partitioning کہتے ہیں thin layer kermitگرافی جسے tlc بھی کہتے ہیں adsorption kermitگرافی کی ایک form ہے اور اس word سے ہم سمجھ سکتے ہیں کہ ہماری stationing فیز یہاں solid استعمال ہو رہی ہیں hplc high performance liquid kermitگرافی یا high pressure liquid kermitگرافی یہ pressure flow کے ساتھ کام کرتی ہیں اور column kermitگرافی جس میں glass column کو استعمال کرتے ہیں اور gravity کی وجہ سے ہمارا liquid flow کرتا ہے gel کے اوپر یا silica کے اوپر تو اپنی mobile phase کی وجہ سے ہمیں a gas اور liquid میں مختلف format کے اندر separate کر سکتے ہیں اے discuss کرتے ہیں mobile phases جو استعمال ہوتی ہیں بہت کاملی لیوز ہوتی ہیں اس سلیڈ میں میں ان کو low polar سے یا non polar سے polar کی طرف ارینچ کیا ہے low polar solvents جیسے زیلین یا talleen یا hexanes یا diethyl ether یا tetrachloromethane یہ non polar solvents ہیں اگر ہم solvents کی polarity بڑھانا چاہیں تو اس سے نسبتن زیادہ polar solvent کو ہم اس میں add کرتے ہیں one person solution, two person solution ten person solution and finally pure medium polar these medium polar solvents جیسے chloroform dichloromethane اور ethyl acetate commonly love میں استعمال ہوتے ہیں اس کے بعد مزید polarity بڑھانے کے لیے ہم ان میں highly polar organic solvents کو استعمال کرتے ہیں جیسے ethanol یا methanol ethanol methanol کی اگر polarity کو ہم نے زافہ کرنا ہو تو ethanol اور methanol میں water کو solvable کرتے ہیں water بھی polar ہے لیکن ethanol methanol organic solvents ہیں اور water کو inorganic solvent کانسرر کیا جاتا ہے اگر ہم نے polarity اس سے زیادہ بڑھانی ہے آپ نے non polar سے polar کی طرف جاتے ہوئے تو پھر ہم اس موال face کے اندر buffers کو ایاد کرتے ہیں یا بعض وقات organic acids کو استعمال کرتے ہیں organic basis کو استعمال کرتے ہیں جیسے trimethyl amine کو استعمال کرتے ہیں یا diethyl amine کو استعمال کرتے ہیں اس طرح citric acid یا oxalic acid یا acetic acid کو استعمال کرتے ہیں polarity دینے کے لیے اور finally buffer solution اس میں تو purely ہم salts کو استعمال کرتے ہیں جہاں پہ hvlc میں ہمارے solvent یا ہمارے analyte اس طرح کیا ہوں کہ وہ کسی خاص موال face سے جو buffer یا کسی خاص pH پر ہی علق ہو سکتے ہیں تو پھر buffer solution کی form میں اپنے موال phases کو بناتے ہیں تو یہ low polar سے یا non polar سے polar کی طرف these solvents کو ہم نے arrange کیا ہوا ہے