 کرموڈگرافی میں مبال فیز کو دیسکس کر لنے کے بعد اب ہم سٹریشنی فیز کو دیسکس کریں گے سٹریشنی فیز مختلف کسم کی استعمال ہوتی ہیں جیسے پیپر کرموڈگرافی میں فلٹر پیپر اس کا سالولوز فائبر یا اس میں ٹیپٹ وٹر مالکل سٹریشنی فیز کے طور پہ استعمال ہوتے ہیں سلکجل یا علمینہ یا پولیمائٹس جو ہم ٹیلسی کارٹس پہ استعمال کرتے ہیں جیسے ٹیلسی پلیٹس المینیم پلیٹ کی اوپر ڈپوزٹ کی وی پلیٹس ہیں جس میں سلکجل بھی استعمال ہوتا ہے اور علمینہ کو بھی استعمال کرتے ہیں یہ ٹیلسی پلیٹ ریورٹس فیز کے لیے بھی بنتی ہیں جنے احپی ٹیلسی کہتے ہیں اور نورمل فیس کے لیے بھی نورمل ٹیلسی پلیٹس بنتی ہیں اِن سلکجل کے علاوہ ہم اس میں کچھ ایسا مطیرل بھی استعمال کرتے ہیں جو یوی لائٹ میں گلو کرتا ہے اسنسکویلین، کاروبویکس یا دائمیتھائل، پالی ساکزین، یہ کمپاونٹ جیسی گیس کمٹ گرافی میں استعمال کرتے ہیں اور ان کے لئے سٹریشنی فیزیز ان مالیکیول سے بنا جاتی ہیں، اگانک مالیکیول ہیں، بہت لمبے سٹرکچرز ہیں یا ہیڈو کاربنز ہیں جن کو اس مقصد کے لئے استعمال کر جاتا ہے۔ سی ایٹھ، سی ایٹھین، یہ کولمز استعمال ہوتے ہیں ایٹھ پیلسی میں جہاں ریورس فیز سلکہ کے لئے بجائے کے ہیڈوکسل ہماری سلکہ جل میں آخر میں اس کو پولا کریں، ہم اس کے ساتھ ایٹھر لنکیج کر دیتے ہیں اور اگر آٹھ کاربن والی چین انگیج کرتے ہیں تو سی ایٹھ لنکیج بنتا ہے، اگر اٹھارہ کاربن کے مالیکیول ٹیچھ کر دیں تو سی ایٹھین کولمز بنتے ہیں، ہم ان کی کمیسٹری کو دیٹیل سے آگے دسکس بھی سی ایٹھین یا سیلیکون کولم، لائکو سوپس کولم، مختلف کمپنیز کے بھی کولم دفر کرتے ہیں اور مینلی سی ایٹھ اور سی ایٹھین اس سلکہ کی بیسیس پہ ہم ان کو دفرنشیٹ کرتے ہیں تو ایٹھ پیلسی میں ہم ان کولمز کو استعمال کرتے ہیں مختلف کارمڈوگرافی کی تایپس ہیں جس کی بیسیس پہ ہم سیپریشن کرتے ہیں مختلف کارمڈوگرافی کی تایپس ہیں جس کی بیسیس پہ ہم سیپریشن کرتے ہیں اگر ملکل اور ویٹھ یا ملکل کے سائس کے مطابق ہوگی یعنی کسی ایک خاص سائس کے ملکل کو تو ہمارا سرشنی فیز جانے دے گا اور کسی ایک خاص ملکل اور ویٹھ یا سائس کے ملکل کو روک لے گا جل فلٹریشن اس کی ایک ایک سیمپل ہے جل یا جلٹن اس کو سمجھنے کیلئے جلٹن ہم گھروں میں استعمال بھی کرتے ہیں جو عام طور پہ حدیوں کے گودے سے حدیوں سے ایکسٹرک کی جاتی ہیں اس طرح آپ لوگ انہیں اس پہ گول کے چلکہ کو اگر اس میں پانی موجود ہو تو وہ میسلیج کریٹ کرتا ہے ایک جل سا بناتا ہے اس طرح توخ ملنگا ایک پروڈکٹ ہے جو رگولر کچن میں استعمال ہونے والی ہے پانی جب ایٹ کرتے ہیں تو یہ بھی ایکسپوز ہو جاتا ہے پھول جاتا ہے اور ایک میسلیج کریٹ ہوتا ہے یہ جو تک مطیریل یا اس کا سائس بڑھ جاتا ہے پانی کو لے کے تو یہی بیسی کری جل ہے اس جلٹن کو علک کر کے استعمال بھی کیا جاتا ہے اور یہ جلٹن اگر سلکان سے یا سلکہ سے فام کی جائے تو اسے سلکہ جل بھی کہتے ہیں تو سیف میکنیزم میں ہم جلٹن کی مختلف تاپ کو استعمال کرتے ہیں سنتھائٹی کمپونٹس کے طور پہنے کو بنا جاتا ہے چارج انٹریکشن کی بیسیس پر اگر ہم کمپونٹ کو علک کر رہے ہوں تو اسے ہم چارج انٹریکشن یا چارج کرموٹگرافی کہیں گے سپریشن بیسٹرنٹ چارج عام طور پہ زیو لائٹ کا نام آپ سنتے ہوں گے کہ جو water filtration plant میں استعمال ہوتا ہے کسی خاص چارج آینز کو کم کرنے کے لیے یا reverse phase کرموٹگرافی کے اندر یا بازوکات ایسے کولمز جن سے ہم water میں موجود آینز کو نکالتے ہیں trap کر کے اس میں ہم اس سپریشن تیکنیک کو استعمال کرتے ہیں solubility characteristics solubility کی بیسیس پر سب سے زیادہ ہم کرموٹگرافی کو استعمال کرتے ہیں hydrophobic hydrophobic سے مرات جہاں water استعمال نہیں کرتے بلکہ organic solvents استعمال کرتے ہیں نمالی ہمارے جو solid material یا سرشنی phase ہے وہ بھی hydrophobic ہے اور عام طور پہ جو مبایل phase استعمال کرتے ہیں وہ بھی hydrophobic in nature ہوتی ہے تو hydrophobic کرموٹگرافی میں ہم solubility کی بیسیس پر organic nature کے اندر اگر ہمارے molecule ہیں اور وہ separate ہو سکتے ہیں دو مختلف polarity کی solvents کے ساتھ ہمارا mobile phase نسبتن less polar ہو اور ہماری silica gel نسبتن polar ہو تو اس بیسیس پہ جب separation کریں گے تو اسے hydrophobic کرموٹگرافی کہیں گے reverse phase کرموٹگرافی جس میں silica gel کو ہم non polar کر لیتے ہیں اور solvents کی polarity بڑھاتے ہیں نہ صرف organic solvents بلکہ با ذکات hydrophilic کرموٹگرافی بھی کہ ہم water اور water based puffers بھی استعمال کرتے ہیں اس کرموٹگرافی میں اس طرح adsorption ایک physical phenomena ہے جس میں ہمارا molecule یا analyte یا جس کو ہم separate کرنا چاہر ہیں وہ adsorb ہو جاتا ہے surface کی اوپر یہ وقتی طور پہ adsorption ہو گی definitely اگر اس کی زیادہ solvability والا molecule mobile phase کے طور پر run ہو رہا ہوگا تو وہ station phase کو چھوڑ کر mobile phase کے ساتھ بھی run ہونا شروع ہو جائے گا اور normal phase جسے ہم نے hydrophobic کرموٹگرافی کے اندر بھی دسکس کیا ہے چاؤتھی طریب بالوجیکل اور SPECIFIC انٹریکشنز کی بیسس پر اگر ہم separation کر رہے ہیں تو کپچر کریں گے ہم molecule کو کسی خاص quality کی بیسس پر جسے enzymes and trap کر سکتے ہیں آپ enzymes کو ہم دسکس کرتے ہیں lock and key model میں تو ان کو trap کرنے کیلے کو ایسا trap موجود ہو جہاں پر وہ lock and key کی طرح fix ہو جائیں تو ان trap میں affinity chromatography یا di chromatography انٹیجنز کو سپریٹ کرنے کیلئے enzymes کو سپریٹ کرنے کیلئے ہم بالوجیکل اور SPECIFIC انٹریکشنز کی بیسس پر بھی کرموٹگرافی تیکنیک دوالب کرتے ہیں اگلی slides کی اندر ہم مختلف کرموٹگرافی تیکنیکز کو دیٹیل کے ساتھ دسکس کریں گے جس میں پیپر کرموٹگرافی اور پھر than layer کرموٹگرافی جس ہے TLC کہتے ہیں column کرموٹگرافی جس میں glass column اور اس میں موجود silica سپریٹشن کیلئے سمال ہوگی اس طرح electrophoresis اس بالوجی میں بائیکمسٹری میں کومنلی سمال کرتے ہیں electricity کی بیسس پے ہم سپریٹشن کرنا چاہے ہیں high performance liquid کرموٹگرافی جس میں ہم پرشر کے ساتھ اپنے mobile face کو کسی stationy face کے ساتھ run کرواتے ہیں high pressure high performance جس میں سب سے زادہ استمال ہونے والی ہے گیس کرموٹگرافی جو مختلف گیسس کو سپریٹ کرنے کیلئے مختلف perfumes کو سپریٹشن کیلئے اور ان کی quality کنٹول کیلئے استمال کرتے ہیں اس طرح مختلف trace elements کو جیسے پیسٹرسائر ریزلیوز یا فلاٹوکسن ان کے لیے میں گیس کرموٹگرافی کو استمال کرتے ہیں تو یہ مختلف کرموٹگرافی تیکنیک سب سے زادہ استمال ہونے