 Уважаемые участники, приветствую вас на сегодняшнем тренине. Меня зовут Тибор Сидж, я специалист по животному отству и я помогаю организовать наши трениники. Сейчас передаю слово господину Райзман, старшему специалист по здоровью и производству животных. Эран, пожалуйста. Спасибо. Доброе утро. Уважаемые коллеги, позвольте приветствовать вас с Атиманией Фау. Меня зовут Эран Райзман, я специалист по охране здоровья животных, регулированной офисе Фау по Европе и центральной Азии. Мне приятно видеть такой активный интерес к теме тренинга. Сегодня, как никогда, мы понимаем, как важно быть готовыми со списком болезни. Значимый аспект – это готовность способностей современной и правильной диагноза болезни. Правильный диагноз может остановить списку болезни ещё до того, как она станет эпидемией. Сектор птичотства в нашей регион развивается и с каждым годом повышается его значимость. Очень важно обновлять наши знания болезням птиц от самых лучших экспертов. Лиаминя большая честь предоставит нашу спикера, доктор Марина Энгод. Доктор Энгод, специалиста с большим оптом в диагностике болезни птиц. Челяю вам продуктивного тренинга и надеюсь, что информация сегодня будет полезной в вашей работе. Спасибо большое. Спасибо, Эра. А сейчас продаю слово господже Марина Энгод. Марина, пожалуйста. Спасибо большое. Друзья, поставьте единички, это на воду вести. Насколько хорошо меня слышно. Будьте добры. Я постараюсь сегодня работать интерактивно, учитывая наш формат встречи. Мне бы не хотелось, чтобы мы отрывались, несмотря на расстояние, которое есть между нами. Спасибо за десятки. Я надеюсь, мы также активно будем работать и в течение лекции. Что ж, друзья, рада, что вы пришли сегодня на встречу. Решили посредить это время в рушении своего профессионального уровня. Я тоже немного волнуюсь, но это пройдет. Хочу также поблагодарить продовольственную и сухосхозяйственную организацию ФАО и лично Эра Нурайзмена за то, что мне дали такой возможность провести это онлайн мероприятие и то, что они способствовали, потому что мы сегодня с вами здесь собрались. Отдельное спасибо Тибору Заксу, который помогает нам сегодня в проведение онлайн мероприятия. Хотелось бы отметить также ассоциацию Усптицепром в Республике из-за Пекетстан, которая своим обращением ко мне с просьбой помощи модернизации своей уже существующей лаборатории подала идею провести этот курс. Для начала давайте познакомимся. Кто-то из вас уже меня знает, кто-то нет. Напишите, пожалуйста, откуда вы, в каком качестве вы работаете сегодня и где. Также хотелось бы узнать, что вы хотели бы получить от присутствия на нашем курсе, какие задачи вы перед собой ставите. Вы планируете начать карьеру лабораторного диагноста или уже проводите диагностику. Это мы, конечно, все сразу не опишешь. Мы будем общаться еще шесть лекций, которые перед нами. Насчет вопросов, которые будут у вас возникать, пишите, пожалуйста, их в чате. И в зависимости от сложности вопросов я буду отвечать по ходу или в конце лекции. Да, вот вижу ваши ответы. Спасибо, спасибо. Пишите, мы все обязательно... Это все очень важно, спасибо. Алексей, Зоя, Урмат, спасибо. Что ж, друзья, я приготовила для вас подарок. Для тех, кто наиболее заинтересован, для самых серьезных и настройчивых, тех, кто останется до конца лекции, в качестве ценного подарка я подготовила анкету, самопроверки по качеству принятия нейро, для безопасности на предприятии. Как известно, инфекционные заболевания легче предотвратить, чем лечить. Поэтому мы... Эй, танки, это вам поможет самим ответить на вопрос, в каком состоянии на предприятии у вас сегодня находится без безопасности. Что ж, давайте... Для тех, кто меня не знает, я немного представлюсь. Я, доктор науката Иерусалимского еврейского университета. Моя специализация, я ветеринарный врач, но уже давно специализируюсь по лабораторной диагностике за разных болезней. Я эксперт по диагностике за разные болезни и ветеринарного института, ну и, естественно, участник многоочисленных международных конференций. Это наш ветеринарный институт. Имени Кимрана. Когда-то, переехав в Израиль, я ветеринарную свою... статус ветеринары я получила от Московской ветеринарной академии. И в 2000 году переехала в Израиль и уже с 2000 года работала в институте ветеринарном институте имени Кимрана. Вот так выглядит это наш институт. А справа вы видите одна из комнаток с оборудованием. Нужно затем в 2010-м я закончила Иерусалимский университет, получила докторскую степень, работала и училась не отрывно от производства. Почему птицоводство, друзья? Потому что, прежде всего, это важная сельсхозяйственная отрасль и источник животных белков для населения многих стран мира. Также важно отметить, что при современном интерсимном выращивании, когда большие количество поголовья, собранных на ограниченных территориях, наиболее важна быстрая постановка правильного диагноза с помощью лабораторных исследований. Также это важно для защиты здоровья людей и животных от возможных биологических таксических воздействий. Да, вижу ваши ответы. Спасибо. Спасибо, друзья. Какие темы мы сегодня рассмотрим? Основная тема – это лабораторный диагностик конфекционных болезней. Мы пройдемся по основным методам, которые мы использовали и используем еще сегодня. И я упомяну о нескольких новых, которые уже начинают постепенно входить в нашу лабораторную жизнь. Друзья, если мы говорим о лабораторной диагностике, то прежде всего хотелось бы определить ее место. Основная наша задача – это постановка правильного диагноза. В этой схемке я хотела обозначить место лабораторной диагностики. При возникновении проблем с здоровьем птицей главной задачей является поставить правильный диагноз. И лабораторная диагностика – это один из инструментов для постановки правильного диагноза. Обратите внимание, коллеги, что если мы имеем положительный и отрицательный ответ после проведенных исследований, но он никак не подтвержден другими составляющими, то этот результат подбегается в большом сомнению и должен быть проверен дополнительными методами или лабораторная работа должна быть проведена снова, и, возможно, основан забором проб. То есть, я здесь немного раскрыла каждую из позиций, но эти позиции, конечно, можно раскрывать, дополнять бесконечно, чем больше у нас данных, которые мы анализируем тем, точнее, наш диагноз. Мы должны, прежде чем мы начинаем лабораторную работу, конечно же, мы выясняем анамнес, учитывая подробную историю болезней, возраст птицы, клинические признаки, как содержалось птица. Собственно, это одна из работ и клиническая врача тоже, но нам, как и лабораторным работником, мы нельзя работать только в лаборатории, как бы смотреть только на пробы, которые мы получаем. Мы тоже должны иметь всю полную картину, знать все вот эти составляющие, учитывать вид птицы, генетические предырсположенности, данные по вакцинации, эпидемиологические данные в районе и посредственно в хозяйстве. Обязательно, конечно же, мы должны делать анатомические вскрытия. На какие основные группы мы можем разделить лабораторные анализы? Это бактериологические, вирусологические, сирологические, методы молекулярной пиологии, а также методы масс спектрометрии. Друзья, еще с несколько слов хочу сказать о том, что, когда начинается падеж и витеринарные врачи, начинает нервничать, они забывают проверить все данные, включая обстановку по поставке кормов. И, казалось бы, на первый взгляд, не отношащиеся к делу данных. Это не эффективное заболевание, но гораздо более эффективно было бы сначала успокоиться и выяснить все составляющие, выяснить все, все, все данные. Я могу привести из своей практики один пример, когда к нам обратились с одной из российских птицеферм с просьбой проанализировать ситуацию. У них моментно произошел большой падеж. Плюс они получили положительные результаты из одной из лабораторий, о том, что якобы пробы были положительны на одно из информационных заболеваний. Взглянув на результаты, я увидела, что показатели, они довольно поздние. Появление рилта МПЦР были поздние нунуфлористенция. Для тех, кто немного уже в теме, они понимают, что позднее появление нунуфлористенция говорит о том, что количество патогена в пробе довольно низкое. Но если учесть, что заболевание довольно протекает, протекало довольно остро, то этого просто не могло быть. То есть должно было в каждой пробе быть огромное количество вируса. Поэтому, когда человек, то есть порой проблему можно решить обычной человеческой логикой, то есть, если нет у вас результаты лабораторной анализ, не подтверждён ни клиническими признаками, ни патолога-анатомическими, ни эпидемиологическими, ни какими-другими, это означает, что результат большим сомнением. Воделение и появление характеристиков и взбудительных инфекций основываются на классических методах фактического культивиерония, выделение характеристики и иммунологических анализах. Также мы используем методы молекулярной биологии, которые могут не требовать фактического культивиеронии изоляться организма для диагностики. Но по-прежнему, выделение возбудителя занимает важное место в процессе расследования. Воделение, когда мы выделяем взбудитель, мы можем оценить верулентность и, соответственно, патогенез, протекание инфекционного заболевания, а также это важно для разработки вакцин. Если мы выделяем, скажем, бактериальный патоген, то мы, естественно, можем исследовать на чувствительность с антиготиком. Также важно учитывать несколько дополнительных аспектов. Это то, что организм не стерильный и сразу несколько возможных возбудителей инфекционных болезней могут находиться, так сказать, на месте происшествия. Мам важно определиться, кто первичный и вторичный патоген, чтобы, так сказать, один патоген не упустить другой. Важно знать, кто может стать причиной заболевания и в лаборатории создать этим патогеном условия для их выделения и лентификации. Мягко говоря, я могу привести пример с Ишерихи и Коля. Когда-то мне жаловалась одна из работниц лаборатории о том, что она выделяет и Ишерихи и Коля практически в каждом своем исследовании. И неудивительно, друзья, Ишерихи и Коля можно найти везде. Это патоген, который имеет хорошие прекрасные способности проникать в ткани. Но далеко не всегда он достаточно силен для того, чтобы вызвать заболевания. Если он очень расслаблен или, например, уже в трупе, он тут же начинает развиваться и практически всегда мы его можем выделить. То же самое верно в отношении других патогенов, которые мы будем рассматривать в следующих наших занятиях. Какой ориентировочно алгоритм действий в лабораториях. Мы можем знать анамнис, рассмотреть патологантамические признаки, сделать отпору, отбор проб. Порой люди в лабораториях, специалисты в лабораториях получают пробы, которые уже отобраны клиническим ветеринарным врачом. Это, конечно, возможно, но желательно делать патологантамические скрытия самим. То есть в лаборатории должна иметь возможность комнату для скрытий. Тут же, когда мы отбираем пробы, мы можем сделать окрашивание по грамму. То есть первичный анализ можем уже провести. И довольно часто уже на первых этапах мы можем получить довольно много информации. Тут же мы можем сделать микроскопию затем пробы, отобранные пробы посеять на среды. Тут же можем сделать антибиограмму, то есть одновременно сея на накопительные среды, мы можем уже, тем более, если подозреваем селегическое заболевание причину бактерички в агентам, мы, чтобы не терять время, тут же можем посеять на среду для сделать антибиограмму. Затем мы уже в последующих пересевах и в соответствии с тем, что мы получаем, можем использовать селегическое исследование, продолжить пересев на селективных средах. Как я уже сказал, лаборатория должна иметь помещение для проведения вскрытия и забора проб. На основании пота алганатомических признаков мы можем получить очень-очень много данных. Здесь могу порекомендовать на этой фотографии книгу, которую я рекомендую всем к прочтению, чтобы вы имели ее в своем арсенале. Очень хорошая книга, там все много иллюстраций с объяснениями и она на сегодня натункойться в открытом доступе. Здесь я привела вам сайт. Слайдшер, вы набираете этот сайт, вбиваете в поиск названия и вы можете получить практически полный доступ к этой книге даже совершенно свободно. Важно подчеркнуть, что правильный отбор проб, а от них зависит результат вашей работы, в лаборатории, нельзя переносить и сказать, что это ответственность клинического врача, который посылает вам пробы. Что нужно для начального этапа? Конечно же, нам нужно знать антамическое строение организма птицы, чтобы правильно сделать забор, сделать вскрытие, знать что такое норма и отклонение от нормы, знать патологонтамические признаки каждой инфекционной болезни, учитывать трапизму различных патогенов. Я надеюсь, что вы знаете, что такое трапизм, то есть каждый инфекционный агент предпочитает определенные органы, где он может размножаться. Использовать правильность помогать инструменты для взятия проб и в нужном количестве, что у него не важно. Обязательно при работе соблюдать биозабезопасность. Мы всегда помним об этом, чтобы наша работа была во благо, а не для распространения инфекции. Здесь всего лишь две фотографии. Так выглядит ветеринарный врач, который приезжает на хозяйство, обычно это происходит, когда мелкая хозяйство и ветврач не постоянно работает с одним клиентом, а у него несколько фирм. На птицах-фабриках, насколько я знаю, у них немного останка другая, всегда есть свои врачи. И они, конечно, у них немножко другие порядки, пребываем на работу, мы переодеваемся, и уже идем работать. Первый этап – микроскопия. Кстати говоря, вот я вижу у нас довольно много здравствуйте, сына Грузия. Спасибо, что вы написали. Скажите, пожалуйста, насколько часто в своей лаборатории вы пользуетесь микроскопическими исследованиями? Пока я могу сказать, что микроскопия, несмотря что это давний и хороший наш друг, он сегодня нам может очень хорошо помочь. Что мы можем сделать? Например, подозревая пастрелес, мы можем сделать мозок с крови, при бактеремии мы можем обнаружить вот такие характерные кокобоциллы, как вы видите, с правой стороны, и это может нам помочь уже на самом первом этапе. Затем кластеридиум перфрингенс. Отлично, Мария, я вижу. Кластеридиум перфрингенс. Мы можем точно так же покрасить, увидеть эти характерные признаки кластеридиум, как вы видите, как он выглядит. Громотрицательная палочка. И когда мы видим практически чистую культуру, то есть очень много палочек в одном поле, при микроскопии, это говорит о том, что, скорее всего, как раз он кластеридиум и является проблемой. Также я в последствии, когда мы будем рассматривать кокцидия, я вам скажу о прекрасном методе, которая позволяет нам уже на первом этапе, во-первых, мониторить состояние кокцидии, а во-вторых, всегда при желании оценить, насколько хорошо работает кокцидиостатик нужно ли предпринять лечение. Здесь вы видите бактериологические методы, которые мы пользуемся постоянно. В отделении на питательных средах, которые бывают основные, богатительные, элективные, дифференциально, диагностические. Мы сеем на фёрдую среду и, конечно же, смотрим на аморфологию при росте, стимули, скорость роста, изменение цвета среды, подвижность бактерий, чувствительность к воздуху. Беохимические исследования помогают нам определить биохимические свойства различных бактерий. Обычно мы имеем на распоряжение вот такие, как вам сказать, рецепты по продолжению работы, по тому, как можно вести короткий план, как мы можем продвигаться для того, чтобы определить, какого именно вида наша бактерия. Мы можем также пользоваться такими советными, скажем такими предложенными рецептами для администикации бактерий, который нам предлагает семерная организация по охране животных УАИ. Я о них скажу позже в конце занятий, чтобы вы всегда при желании могли зайти на сайт УАИ и скачать наиболее рекомендованные техники из патогенов. Также из независимой международной организации орган по стандартизации часто предлагает нечасто, а все время, можно сказать, для каждого патогена похожие рекомендации, которые мы можем и должны пользоваться на постоянной основе. Несколько слов о вирусологических методах. Вы о них, я думаю, тоже знаете. То есть это выделение вирусов на яйцах аспеев, яйцах аспеев, полученные от птиц, которые не прошли вакцинацию. В них нет никаких антител, и любой вирус может практически у них размножаться. Работа с вирусами требует особой квалификации, оборудования, разрешения для лаборатории. И поэтому это менее доступно. Но это имеет место быть и мы можем пользоваться этим тоже, если ваша лаборатория позволяет. Также одним из способов в отделении вирусов, способ, относящийся к вирусологическим методам, называется использование культура в клетах. Когда мы используем... Конечно, этот способ используется меньше для в области лаборатории, но, тем не менее, обычно мы можем использовать его для в отделении вируса Западного Нила. Вируса очень эффективно растет и образует бляжки на клетках веру. Эпители, почки, мартышки. Обычно вызывается сильный цитопатический эффект. И образуют прозрачные бляжки. С левой стороны вы видите культуру клеток, которая здорово, не заряжена вирусом. И справа появляются клеточки сверху, кругленькие. Это зараженные клетки. Таким образом выглядит цитопатический эффект, который может варьироваться от вируса к вирусу. Иногда мы видим просто плаки, когда клетки разрываются и образуются вот такие невырки в монолайр. Сирологические методы, друзья. Они исторически сложились, что в России и в странах обышала Советского Союза методы наиболее распространены в использовании. И периодически на различных формах я слышу о том, что антитела очень специфичны. И сирологические методы это основной очень эффективный диагностический инструмент. Но давайте вспомним немного теории для того, чтобы понять, насколько антитела специфичны и когда. И какие антитела? Иммунная система курицы, как мы знаем, состоит из бурсов априцу, косного мозга, стилизион, тимуса и других органов. Вообще, к сирологическим методам можно отнести все методы, которые используют в своей механике, что ли, выявление антител и антигенов. И используется вот эта реакция антитела-антигенов. Антитела, как известно, это один из компонентов иммунной системы организма. А иммунитет – это способность организма поддерживать целостность и биологическую индивидуальность путем распознавания удаления чужеродных веществ и клеток. Птица постоянно подвергается атакам вирусов, бактерий, грибкам, прозитами. Прозиты тоже ее постоянно атакуют. Естественно, нее имеется врожденный иммунитет, который состоит из макрофагов, метрофилов, интерферона, комплимента, лизозима. Чем она характеризуется в врожденный иммунитет? Она – это быстрый ответ на вторжение микроорганизма. Но она имеет низкую специфичность. И нет памяти. Клеток памяти еще не образована на этом этапе. Чем отличается приобретенный иммунитет от врожденного? Приобретенный возникает в результате, когда патоген продолжает атаковать. Организма клетки начинает получать тренировку. И мы постепенно получаем приобретенный адаптивный иммунитет, частью которого являются велифоциты, иммуноглубилины, цитакины. Приобретенные адаптивные иммунитеты – это поздний иммунитет. И у него есть иммунологическая память. К этому времени уже вырабатывают секретки памяти, которые при новой атаки быстро реагируют, быстро вырабатывают специфические антитела. Мы говорим о том, что приобретенный иммунитет отличает от врожденного большей специфичностью. Давайте скажем несколько слов, а рассмотрим, что такое вообще антиген. Когда мы говорим антиген, мы зачастую имеем в виду целый микроорганизм. Вот как на этой снимочке у меня это фотографии рисунки внизу слева. Но если вы обратите внимание, что на эту бактерию ты увидите, что у нее очень много епитопов. То есть каждый из этих епитопов мы можем назвать отдельным и антигеном. То есть это общая, большая бактерия – это, как вам сказать, комплекс не несколько, а большого количества маленьких и детерминатов антиген. Соответственно, иммуноэссистену в целом специфически распознает много тысяч различных антигенов. Но специфический иммуноответ основан на том, что каждая отдельная антитела или амфоцид способна специфически распознавать только один епитоп. Когда макрофак переваривает антиген, он его разбирает вот как раз на эти маленькие маленькие антигены. И каждый из макрофагов предоставляет иммуноэссистеме этот маленький антигент. И в результате мы получаем полеволентную сыворотку, которая содержит много различных антител к разным этим маленьким епитопам. Затем, когда вырабатывается специфический иммуноответ, он основан на том, что каждая отдельная антитела или амфоцид способна специфически распознать только один епитоп антигена. Сначала этих специфических антител-олимпоцидов очень мало. Но в то время, когда антигент присоединяется к клетке, он стимулирует ее на пролиферацию размножения. И таким образом происходит клональная селекция специфических антигент, связывающих клеток. Другим языком при первоначальном иммуном ответе мы получаем огромное количество различных антител. Клональная антитела. Но потом, когда инфекция продолжается, подтверждение получает не все антитела, а только определенные, те, которые специфически подходят этому антигену. Таким образом, мы получаем уже высокоспецифичную защиту организма. То, что вы видите на этом рисунке, то, что рассказывают, как раз вот изображено схематично. В результате мы, после созревания этих клеток, мы получаем клетки памяти, быстро уже последствия вырабатывают антитела, специфические антитела на этот антигент и эффективные клетки обеспечивающие ему на ответ. Еще раз я хочу повторить, что в самом начале, в ответ на первое проникновение инфекционного агента в организм производится м-антитела, которые мало специфичны. Они работают, но если им все же не удается удалить патогент из организма и атака продолжается, то происходит вторичное ведение антигена, как вы видите на рисуночке. И вторым утапом мы уже получаем высокоспецифичных антител, более специфичных к этому патогену. Реэкспозиция антигена как нам походить в 2-й раз инфекционный процесс продолжается, происходит повторный пик производства м-антител, конечно же, но уже гораздо больше г-антител, которые более специфичны. Не могу не упомянуть о моноклональных антителах, которыми мы очень часто пользуемся в нашей работе. Вот когда я могу сказать, что эти антитела имеют высокую афинность, высокую обидность, но важно отметить, что это искусственно сознатные антитела, и это довольно кропотливая, сложная работа. Что это означает? Сначала происходит, мы иммунизируем мышку и после иммунизации мы берем ее селезенку, расплавляем на отдельные клетки, вместе с гибридомой соединяем для того, чтобы каждая отдельная клетка, каждая отдельная антитела, как мы говорили, каждая клетка в селезенке, она вырабатывает совершенно другое антитело. Они все эти антитела немножко работают по-другому, то есть, до этого макрофаги представили немного другой антиген, поэтому они все практически немного различаются. Мы их расплавляем, затем вносим в первичную культуру клонируемых, это так называемые клонируемые, и практически у нас в каждой лоночке получается клетчная культура, которая выращена из одной клетки, которая вырабатывает один вид антителов. Поэтому мы имеем такое название моноклональные антитела, то есть фактически они из их источник, из одного, из одной клетки, и они все вырабатывают только один вид антител. Затем в лаборатории проводится исследование, какой из этих антител лучше всего работают, то есть предназначено и видит, что это способно схватить этот патоген, против которого мы иммунизировали нашу мышку. Я лично работаю много с моноклональными антителами, и могу сказать, что это каждый раз просто поражает, насколько действительно антитела могут выполнять свою работу. Напишите, друзья, вы пользуетесь своей работе моноклональными антителами? Есть кто-либо из вас, кто уже сегодня выполняет какие-либо работы с моноклональными антителами? Говоря о сирологических антителах, нет, но ничего это у вас все передискажем. Реакция, галитинация это самый простой всем известный метод я вижу и отвечает иногда и моногистахими. Неудивительно, потому что такая работа, она, конечно, требует выработка антител, требует высокой квалификации с одной стороны и, соответственно, они бывают драговатыми, и мы их можем использовать. Вот и моногистахими это, конечно, вообще не дешевый метод, но он очень презентабельный. Так вот, реакция, галитинация, самая простая вещь, когда мы используем сыворотку для того, чтобы вернее, антиген для определения для определения присутствия антител в сыворотке крови птицы. Это чувствительный метод, обычно используется для монитория ингостада, но имеет, естественно, недостатки определенные, много положительных и ложно-положительных и ложно-отрицательных реакций. Зачем-то он может не замечать от типичные штаммы. То есть, что такое типичные, соответственно, те, которые имеют антиген, который еще не знаком с антителам, которые мы используем. Это текст, который требует последующего подтверждения. Да, вот на снимке вы, конечно, видите, самый верхний слева это, когда мы видим конгломераты, образующиеся после взаимодействия антител и антигена. Отрицательный результат это ниже, то есть, он совершенно нет никаких конгломератов, а вот справа, он подозрительный, вы видите такое небольшое затемнение, напоминание этих конгломератов. Следующий тесто, который мне хотел сказать, метод торможения гемоклейтинации, мы зачастую его используем еще до недавнего времени. Использовали, я бы даже сказала, для мониторинга болезнению кастлой гриппа. Также можно использовать для мониторинга инфекционного бронхита. Это более, в чем его суть, в том, что мы используем как дополнительный компонент иритроциты птицы. Используем тот эффект, который наблюдается о вирусу болезнению кастла и болезни гриппа. И они имеют свойства склеивать иритроциты. Соответственно, если мы вносим, если есть вирус иритроциты, вот во второй линии вы видите, если вирус иритроциты он склеивает их, и мы видим вот такой зонтик, так называемый, гемоклейтинация. Ретроциты несколькие, они просто нет реакции, вы видите, как они падают на дно лунычки, а здесь мы видим зонтик, гемоклейтинация, поскольку они иритроциты скреплены вирусом. И в третьего когда есть антитела в ротке, они нейтрализуют вирус и мы видим тоже как иритроциты просто падают на лунки. Так называемая происходит, так называемая иритроцита гемоклейтинация. Что можно сказать о этом опыте, в методе он довольно дешевый, относительно дешевый, и даже мы, даже в наших лабораториях еще совсем недавно им пользовались. Сейчас нужно сказать, мы все больше и больше переходим на методы молекулярной диагностики, но этот метод для мониторинга этих болезней очень даже приемлем. Единственное, что зачастую я вижу, есть ошибки, люди не умеют количественно калибровать и делают ошибки в получении результатов количества вирусов. Также его используют как подтверждающий метод и для мониторинга. Емуноферменный метод эфа, так называемый элайза, которая наиболее распространена, как я уже сказала, на межсоветском пространстве бывшем. Но он тоже основывается, естественно, на взаимодействие антител и антигена. Я думаю, многие с ним знакомы. Кто сегодня проводит, напишите, пожалуйста, кто сегодня проводит эти исследования? Скорее всего, это делайте на постоянный основе. Этот метод имеет высокую кроссреактивность. Кроссреактивность – это когда мы пропустили, да, постарьян, я вижу, проводим. Отлично. Его минус в высокой кроссреактивности. Мы пропустили этот слайд, который я хотела сказать про афинность и праведность. Когда он эти понятия зависит от того, насколько подходит антител к антигену, то ли он сейчас секундочку я перелесну на этот слайд. Афинность – это родственность, это термодинамическая характеристика, описывающий силу взаимодействия антигена и антитела. То есть, когда ротоп абсолютно подходит к эпитопу, то между ними самая высокая видность, вот как вы видите на этом рисунке слева, то есть эпитоп антигена совершенно подходит сайту, который связывается на стороне антитела. Это самая высокая специфичность. И наоборот, когда антитела только эпитоп не очень подходит к паратопу, то афинность связь между антигенами и антителом будет гораздо слабее, но в то же время все равно она существует и как раз на этом и заключается проблема с кросс-реактивностью. Этот метод и монофирменный анализ по статистике имеет очень высокий процент ложных результатов до 20% то есть это ложных позитивные и ложно отрицательные результаты. Также требуется двойной забор проб с интервалом минимум 6-10 дней для сравнения титров как называемая, мы используем сероконверсия. Сероконверсия это время, за которое происходит тренировка иммунной системы и вырабатываются специфические антитела. Когда мы получаем результаты, имеет место будет, зачастую, большой разброс результатов и поэтому этот метод подходит для определения уровня антител после вакцинации, так же как подтверждающий метод, можно проводить с его помощью мониторинг для использования диагностики инфекционных болезней. Этот метод менее подходит по нескольким причинам так как когда начинается инфекционное заболевание, то не вся птица одновременно болеет. Мы все птицы находятся в разных стадиях болезней. Кто-то только начал болеть, кто-то продолжает, кто-то еще вообще здоров. Конечно, при заборе проб мы стараемся взять тех, кто выглядит не очень хорошо и скорее всего уже заболел. Но все равно высокой кросс реактивность в результате не позволяет нам на 100% заключить о присутствии инфекционных заболеваний. Также могу отметить ему на дифозе. Что ж, друзья, в таком случае я рекомендую вам купить эту книгу, приобрести эту книгу. Она того стоит. Очень подробно рассказаны взятия проб. Само к себе заслуживает целого урока хорошего, большого занятия. И эта книга стоит для того, чтобы ее купили. Иммунодефозия в Агаргеле. Кто-либо когда-то использовал из вас этот метод, он довольно прост. Мы заливаем Агар в такие чашки Петри. Делаем луночки. И вносим сыворотку в середину. Или, наоборот, даю 70-ти целей. Например, сыворотку крови. Вносим различные антигены в луночки вокруг. У нас помещаем эту чашку в инкубатор, там, где достаточно влажна, чтобы не высохла за 24 часа. И на следующий день мы можем уже читать результаты. Тоже довольно хороший презентативный метод. И мы им пользуемся. Мы еще о нем будем разговаривать. Говорить конечно же, нельзя сказать, что все методы используются для всех патогенов. Какие-то мы где-то он работает лучше, где-то он работает хуже. И даже в рекомендациях УАИ, вы можете всегда мы будем смотреть в последствии, что они рекомендуют больше и что рекомендует меньше. Он раньше считался даже золотым стандартом для скрининства, вот этот метод и монодефузия в агаргеле. Мы можем с его помощью сделать детекцию всех типов о вирусах гриппа. Как я уже сказал, он легкий, недорогой способ. Недостатки, это неумеренная чувствительность, приблизительно, не количественная, требует 2-4 часа, требует последующие тестирования положительных результатов, и антицела не подаются детекции в течение первых несколько дней болезни иметься. То есть они недостаточно специфичные, то о чем мы говорили раньше. Что ж, друзья, по лиме разная цепная реакция, ВЦР. Этот мет был изобретен Кирим Юлисом в 1983 году. Но поначалу, когда он изобрел этот метод, не было достаточно хорошей подготовки технической подготовки, скажем так. Тогда не было еще термостабильной ДНК по лиме разы. И весь этот процесс, конечно, занимал этой полиме разной цепной реакции, и довольно много времени, был довольно трюдоемом. Я вам объясню почему. Полиме разной цепной реакции, по сути, она это имитация этих процессов, которые происходят в клетке. Как мы знаем, в каждой клетке есть ДНК. ДНК происходит транскрипция, процесс транскрипции, образуется ОРНК, затем сплайсинг, экспорт месседжера ОРНК цитаплазму, и там уже формируется цепная цепочка аминокислот, затем уже формируется пространственная структура портоина. Так вот для наших целей мы используем как раз первые. Итак, а именно транскрипция вернее, не транскрипция, а мы делаем репликацию ДНК с помощью ДНК, ДНК по лиме разной то есть мы берем ДНК и ДНК по лимеразу и размножаем специфический участок этой ДНК. Если же изначально у нас есть рынковый русс, мы делаем добавляем стадию до всего, что я сказала, до ДНК по лимеризации потому что мы не можем делать репликацию амплификацию РНК. Она требует сначала, чтобы ее превратили вирусное ДНК а затем мы уже ее размножаем и делаем репликацию то есть имея изначально РНК вирус, мы добавляем реперстранскриптаза с тем, которые мы позаимствовали у вирусов способных из-за РНК делать когда не встраиваются в клетку да, будет будет записи РНК встраивается в клетку он из-за РНК в помощи своей реперстранскриптазы производит вирусное ДНК встраивает свое вирусное ДНК в ДНК мы используем реперстранскриптазу производим ДНК и затем уже как я уже описала раньше делаем репликацию ДНК то есть нам лабораторным работникам желательно вот эту схему, которая в правой стороны хорошо запомнить зачем она нам нужна не только понять как работают схематично понимать, что происходит в клетке, но когда мы и у нас в лаборатории очень много реагентов различных для ПЦР диагностики для Realtime какие-то из них имеют разные назначения это составляющие вот лично мне всегда эта схема очень хорошо помогает понять, с чем непосредственно я имею дело с реагентами то есть вот это вот как вот эта справа страны эта схемка, она как очень наш для лабораторного работника что же вообще представляет из себя племерозная цифна реакция нужно сказать, что у каждого патогена есть геновный материал это ДНК или ОРНК и какой-то участок этого ОРНК или ДНК он специфичен только этому патогену есть, конечно же разные гены есть гены специфичные именно для этого вируса конкретного есть или бактерии мы возьмем сальмонелл есть то есть любое проявление внешних признаков у патогена и отражается на внутреннем уровне на уровне ДНК или ОРНК то есть всегда есть если у вас есть какой-то новый патоген который отличается с физикой не важно то ли это токсин антиген новые петобы снаружи оно всегда отражается на внутренном содержании то есть на ДНК или ОРНК то есть при желании мы можем его найти на уровне геновном уровне и мы, когда мы исследованию какой-то патоген мы стремимся найти именно вот этот специфический участок который характеризует этот патоген когда мы знаем его содержание мы можем его прочесть из чего он состоит мы можем затем уже создать к нему ключики так называемые праймерами олигонного клеотида коротенькие олигонные клеотида которые соответствуют началу и концу вот этого специфического участка с помощью которых мы потом сможем размножить этот специфический участок собственно как мы проводим эту реакцию мы берем проверку носим туда праймеры которые присоединяются к этому специфическому участку с начала и к концу мы вносим ануклеотины это как кирпички с которым будет строиться наше будущее ДНК также мы вносим темплейт так называемый то есть образец на основе наше пробу на основе которой будет строиться вот этот специфический участок или пробов в котором мы предполагаем что есть вот этот ДНК предлежащий вирус или бактерий также вносим так полимераз так полимераз это интим который строит нашу будущее ДНК и представьте себе вот это все мы внесли и что вы думаете что будет дальше да ничего дальше ничего не произойдет если мы не включим не поставь несем нашу пробирку в амплификатор почему? потому что процесс управляется изменением температуры то есть обычно в организме существует большое количество различных энзимов и амплификацией ДНК это довольно сложный процесс которым занимает участие большое количество различных других энзимов но для того чтобы использовать это явление для наших целей мы как раз придумал что сейчас зная свойства ДНК просто так полимеразый он сказал хорошо, давайте мы можем внести все в пробирку затем мы нагреваем нашу пробирку до 90 градусов здесь схематично изображено то что происходит вот изначально оригинальная ДНК вот эти все более длинные это ДНК-праммер ДНК-праммер затем есть кирпички с которыми строится ДНК нагревая до 94-96 градусов мы делаем производим денатурацию ДНК то есть ДНК разносит расплавляется на две составляющих как вы знаете это двухцепочная молеку она расплавляется в температуре и затем мы быстро ее охлаждаем когда мы доходим до определенной температуры 50-68 градусов прайнеры поскольку они более короткие чем сама длинная ДНК то они быстрее всего присоединяются к своим специфичным местам то есть местам которые они комплиментарны в этот момент ДНК полимераза ее свойство является то, что она видит вот эти возникновения двухцепочных участков и она может пристегниться только в месте где она видит вот это двухцепочную участку она быстренько начинает достраивать нам линию которой не достает комплиментарную той цепочке ДНК которая у нас есть так называемая Анилинг это температура при которой присоединяются прайнеры и затем уже есть Элангация так называемая Элангация и мы получаем в результате вот этот специфический участок затем мы повторяем повторяем эти температуры много-много раз то есть это около 40 и обычно есть 40 циклов по крайней мере и получаем огромное количество амглифицированных ДНК которые затем можем увидеть несколькими способами то ли это вот здесь вот справа с правой стороны мы прогоняем нашу пробу в геле агорозном геле вот здесь вот с правой стороны вы видите участки беленькие это как раз и есть короткие специфические участки амглифицированные то есть там где с левой крайне левой много где вы видите много это маркер для чего мы его делаем чтобы знать какого размера у нас наш амглифицированный участок по его размеру поскольку мы синтезируем раньше уже провели работу знаем какого размера этот амглифицированный участок то мы подозреваем какого размера будет участок который мы амглифицируем и здесь вот вы видите в линии 2-3 это положительная проба 4-5 отрицательная 6-6 скорее всего это положительный контроль и дальше отрицательная с левой стороны мы видим то что вы видели справа это конвенциональный пиццер то есть мы делаем детекцию с помощью агорозного вы видим результаты нашей реакции и слева мы используем Realtime пиццер в машину которая читает повышение иммуна просто флоресценции в каждой пропирке после каждого цикла таким образом мы получаем вот такой график на котором есть повышение катой пробе флоресцентного сигнала в зависимости от того на каком этапе это происходит повышение флоресцентного сигнала мы можем судить насколько много в пробе у нас изначально специфических вот этих участков то есть количество антигенов чем раньше мы видим повышение в флоресцентной тем больше у нас антигена в пробирке и наоборот, чем позже тем меньше хотела бы показать новые относительно новые пиццер машины если раньше у нас в своей практике я исполнила довольно много различных пиццер машин если раньше это были более объемные машины сегодня они идут все идет к тому что они становятся все меньше и меньше сегодня вот у меня есть такой как раз приборчик которым я пользуюсь вполне довольно с высокой революции современный аппарат который размером как вам сказать 30 на 30 сантиметров и весит буквально полтора килограмма то есть он его можно в сумку поставить и носить с собой а вот этот аппарат слева почему я его решила вам показать что есть такое направление это один из новых аппаратов в нем используется катриджи этим аппаратом наверное очень будет удобно пользоваться даже в обычной клинике продаются катриджи которые вы фактически вносите только пробу и вам не нужно очищать для МК или РНК вносится проба и в этом катриджи уже проводится очистка для МК-РНК и дальнейшая амплификация но единственное, что поскольку они один из китайских аппаратов и катриджи, они еще в процессе разработки у них довольно широкий спектр диагностиков для собак и кошек наверное это было бы удобно как раз в клиниках делать в зависимости от стоимости но сегодня в принципе на птицефабриках наверное он бы тоже хорошо прижился, если бы у них если бы у них мы позже я сейчас здесь не видно его название а позже вам скажу, как называется у них еще пока для диагностики болезни птицы, пока еще катриджи нет то есть выберете катриц, ности пробу получайте результат вот на этой панельке потому что самим еще невозможно это сделать если вот такой аппарат справа, как вы здесь видите красники, он универсальный то есть вы покупаете все исходники пластиковые вы можете использовать готовые наборы ПЦР наборы что это означает, что вы можете обычно в ПЦР наборах вам приходят готовые составляющие вы их смешиваете, вносите пробу делите на пробирочке, вносите в аппарат и запускаете процесс, получаете результат вот такой вот такого графика оценивайте результат сами здесь же он больше привязан к этим готовым катриджам сколько проб одновременно можно исследовать на данных приборов вот с правой стороны он 36 проб, у него это роторный аппарат и удобно то, что там количество несенной пробы, не пробы а объем реакции довольно низкий можно работать с 10 микролитрами реакционной смеси друзья, хотела вам рассказать о нашем опыте использования маспек спектром 3 для целей диагностики инфекционных болезней в чем она заключается маспетрометрия, метод идентификации молекул путем изменения отношений, их массы к заряду в универом состоянии то есть измеряется время пролетания молекулы после того как мы делаем ее ионизацию от подложки от матрика до детектора то есть, естественно, каждая молекула имеет свое массу и измеряется это время масса и так далее и показатели сравниваются с данными имеющиеся в наших библиотеках в библиотеках естественно, каждый аппарат он с компьютером как это выглядит мы берем чистую культуру в актерии носим ее на подложку вернее, сначала смешиваем ее с матриксом кристаллическим носим на подложку смешиваем лазерная бомбардировка изолучения тем самым таким образом вещество, если это белок начинает испаряться и уже в зависимости от массы измеряется скорость и измеряется ее масса это приблизительная теория и могу сказать что в нашем какие главные преимущества анализатора это заменяет стандартные биохимические методы мы можем иметь достоверный результат буквально за 2 минуты но важно учесть что это при наличии чистой культуры высокая производимость анализа естественно то есть это быстро 30 проб можно внести на около 30 проб на одну подложку значительное экономие средства если можно так сказать то есть поскольку вам не нужно несколько раз пересевать, различные проводительные различные реакции но важно тут сказать что сам аппарат довольно дорогой то есть у нас есть в институте и он стоил 4 миллиона около того есть возможность также определить различные виды бактерий при наличии библиотек и сегодня мы это делаем когда у нас есть с чем сравнивать мы получаем в результате показатели аппарата определенные показатели но сами по себе они естественно ничего не значат но мы должны сравнить их с данными библиотеки которые у нас уже должно иметься на этот момент на сегодняшний момент пока не все патогены нет этих изучены, нет этих стандартов так называемого библиотека для сравнения показателей также, как я сказала этот метод требует в отделении чистой культуры ну и естественно это высокая стоимость прибора да, это быстро, это красиво удобно, но пока дороговато и нужно учесть, что уметь надо выделять чистую культуру тоже учитывая, что некоторые из наших патогенов плохо растут вернее медленно растут и нужно иметь обледенная квалификацию чтобы их выделить и это конечно тоже составляет определенную проблему да я с этим аппаратом лично пока не очень много работаю, но тот специалисты, которые работают, они утверждают, что можно но опять же, как я сказала что если есть библиотека то есть показатели, то есть какими-то какими-то серотипы какие показатели даёт каждый серотип тогда у вас есть чем сравнить если у вас этой библиотеки нет то вы пока серотипизацию сделать не можете сравнивать нечего друзья, давайте рассмотрим какие, сколько времени берёт каждый из методов бактериологические методы это обычно от 1 до 30 дней почему 30? потому что я имела в виду микоплазма, которая довольно долго может расти большинство наших патогенов растёт быстрее день, два скажем, микобактерии тоже может расти довольно долго затем вирусологические это выделение на живых организмах яйца и линиях пледов от 5 до 20 дней методы молекулярной биологии ПЦР от скажем, от полдня то есть, если мы проводим обычный ПЦР, это сначала отбор проб затем проба подготовка очистка рынка до инка скажем, это час и 15-20 минут минут, если у вас уже есть заготовка всех реагентов вы отработаны от калиброванной методы, то это тоже скажем, полчаса максимум вы всё это смешиваете, делите пробирком, вставляете в аппарат сам процесс бьет 1,5 часа, около 1 час кстати, сейчас индимы, которые мы используем в реакциях модернизируются скажем они всё время сокращаются время амплификации и новый индим позволяет сократить время реакции и скажем, за полдня мы можем легко прогнать пробы, проверить на какое-то определенное предположение но естественно, мы должны друзья знать, на что мы хотим проверить то есть как раз к тому, о чем я говорила в самом начале когда мы оценим общую обстановку и уже задаем вопрос правильный вопрос половина от нашей работы, то есть чем быстрее мы зададим правильный вопрос тем быстрее мы получим правильный ответ всерологические методы обычно берут от одного дня до четырёх дней но медсоведу дни если мы берём элайзу скажем её, можем сделать довольно быстро тоже 4-5 часов но не мне вам рассказывать поскольку вы сами этим методом много пользуетесь и минимально сколько у вас сегодня берёт прогнать иммунуферментный метод напишите пожалуйста в чате очень важные очень важные части для нашей работы, это калибровка и валидация все методы требуют валидации сами по себе они какие-то из них более хорошие какие-то менее хорошие но мы должны, прежде чем мы будем использовать в нашей работе провести калибровку понять как мы, если мы берём ПЦР, диагностику скажем где мы должны понять где ПЦР нам говорит даёт отрицательный результат где он даёт положительный результат как это выражается на том, что мы видим на нашим на нашем графике скажем так то есть, если мы будем тупо просто говорить, что есть иммунуферментная на графике значит это положительный а если её не значит это отрицательный то это совсем неверно друзья, вот я в самом начале да и на вижу 4 часа то, о чём я говорила в самом начале когда человек относится формально то есть он увидел фористенцию и говорит, да, он это положительно в этом месте как раз и происходят ошибки когда человек не учитывает другие факторы и недостаточно калибровал калибровал свой метод то есть он его не очень хорошо знает когда мы делаем калибровку мы знаем, что вот этот вот метод даёт ли он нам неспецифическую реакцию в какой-то момент или нет и если да, то как она выглядит то есть, если у меня метод да, даёт неспецифическую фористенцию я как раз вот эти вот неспецифическую фористенцию беру за свой отрицательный контроль и когда провожу исследование то использую его в качестве отрицательного результата и я знаю, что все пробы, которые близкие к этому отрицательному которые дают вот эту ложную неспецифическую фористенцию они скорее всего будут отрицательные у нас всегда в каждом методе мы используем положительные отрицательные контроли статистические также используем статистические показательные достоверности результаты каждого отдельного метода статистику у нас всегда есть статистика уже проведённых анализов это, собственно, часть ей тоже является частью калибровки и мы желательно нам всегда иметь дополнительный метод для проверки вообще является хорошей практикой использовать несколько методов для то есть мы говорили есть для мониторинга, теологически какой-то и есть PCR метод, если мы хотим если речь идёт о инфекционном заболевании, то это означает есть клинические признаки это означает, что есть развитие патогена он находится в органах, которые он любит заселять мы их берём, мы проверяем и если мы находим присутствует этот патоген плюс со все остальные признаки клинические, патонатомические то это как раз свидетельствует о том, что мы, скорее всего, можем заключить о причине, что этот патоген является причиной этого заболевания инфекционного, который мы подозреваем очень важно в лаборатории стандартизация работы, то есть мы имеем разрабатываем сопы стандарта пирейтинг процедуры это означает, что у нас есть всегда папочка, где мы прописываем как мы должны сделать что у вас это тоже есть напишите, кто из вас пишет сопы, у кого они есть естественно наша задача в лаборатории, в дегнатической лаборатории, не делать каждый раз, что то может, не изобретать менять, а наоборот откалибровать и делать каждый раз одно и то же тогда мы знаем, где мы чувствуем как работает этот метод и как мы можем интерпретировать каждый результат, а если мы каждый раз что-то меняем естественно мы не можем а вдруг мы изменили и у нас вот это то, что мы увидели оно из-за того, что мы изменили нет, наоборот мы стремимся все время стандартизировать нашу работу также мы регулярно проводим профессионский тест профессионский тест это когда из независимых лабораторий нам присылают пробы отлично и мира сопы это обязательный документ действительно во всех лабораториях то есть наша основная задача это стандартизация также профессионский тест напишите, а кто делает профессионский тест когда нам в лабораторию присылают пробы, которые мы должны мы не знаем что в них вернее нам просят проверить на определенную болезнь и мы делаем анализ отлично да, какие отрицательные какие положительные, в какой степени если нам нужно сказать, количество естественно, мы должны делать не забывать делать периодическую настройку калибровка всех инструментов в котором мы пользуемся друзья это очень важно и совсем нетривиально так, давайте перейдем отлично соповедем я рада критерии выбираем методы для диагностика инфекции в лабораторной работе как я уже сказала вопрос, правильный вопрос вот правильная ответа давайте посмотрим что же нужно для того, чтобы выбрать правильный метод во-первых, мы должны знать возможности ограничения каждого лабораторного метода то есть то, что мы прошли сейчас выше я многие основные характеристики сказала есть конечно еще дополнительные нужно, в зависимости от того, что вы используете в своей практике, постоянной практике нужно этот инструмент изучать лучше калибровать, как я уже сказала валендировать и знать где он даёт слабинку или наоборот где его сильные стороны использовать затем уже для нашей работы второе, диагностическая задача вопрос какие они у нас бывают подвергался ли организм таки патогена в прошлом или есть носительство патогена скажите в этом случае, если у нас этот вопрос есть какой метод мы будем использовать напишите, пожалуйста здесь, я бы хотела чтобы вы мне уже ответили мы довольно, многие из нас уже довольно продвинуты пользователи, скажем так и если организм когда-то подвергался, а таки патогена в прошлом какой вы метод будете использовать, друзья напишите, пожалуйста правильно, Михаил отличная, сирология да, если в прошлом то сирология то есть, мы проверяем выработали сливья антитела на атаку патогена в прошлом если у нас вопрос какой микроорганизм является причиной болезни сейчас каким методом будем пользоваться вот сейчас идет какие-то клинические признаки если есть клинические признаки, значит болезни в остром в острой стадии течения есть размножение микроорганизма и скорее всего он присутствует в разных таргетинговых о своих этих органах как это по-русски таргетинги, подскажите вот, да ПЦР, микроскопия абсолютно верно ПЦР ПЦР да, мы можем но имеете в виду в острой фазе ПЦР органы и клетки мишения да ПЦР конечно это отлично и смотрим конечно что мы подозреваем это или бактерия если бактериально мы возиваем на питательной среды если вирус то это конечно более проблематично ПЦР в основном нам поможет дальше вопрос присутствует ли ипотоген в организме сейчас и не является ли он вакцинным штаммом какой мы метод используем, друзья ПЦР, совершенно верно почему потому что у нас есть ПЦР секвенирование тоже можем им воспользоваться смотрите у нас же обязаны производители вакцин метить свои вакцины то есть вакцина должна содержать маркер в своем сериале то есть мы всегда можем произгнать ПЦР, сделать ПЦР именно, а присутствует ли в этом как на болезни Касло есть коммерческие наборы, они сразу дают прамеры на вот этот маркер и на и другие наборы алигоиноклеотида алигос для полеволей это вирус затем присутствует ли патоген присутствующий патоген жив а вот этот вопрос, друзья Д у нас был случай привозили в страну яйца у нас был вопрос присутствует ли патоген то есть если салмонелла на яйцах это раз присутствующий патоген жив да, совершенно верно друзья, то есть ПЦР он может нам с вами показать, присутствует ли патоген но вернее, геномная составляющая но, возможно, эти яйца обработали и патоген уже давно не жизнеспособен, мягко говоря действительно, мы должны его выделить биопробую сделать, предположим какие задачи давайте обсудим, какие задачи вы сегодня еще решаете какие дополнительные к тому, что я сегодня сказала во-первых, пишите ваши вопросы и мы решим вашу диагностическую задачу рекомендую полезные сайты у АИ, как я уже сказала здесь вы находите у вас есть поиск вы входите на сайт вы вбиваете менюал вы даже в гугле можете сразу вбить менюал у АИ и ваш патоген, который вы хотите проверить, что рекомендовано какие методы рекомендованы и насколько они хороши, потому что протокол их, но здесь я сейчас не внесла их но они прям протокол их пишут, что есть вот такие-то вот такие-то методы и табличка какой из этих методов какой из этих методов более рекомендован к использованию вы можете прям после нашего урок сейчас зайти и сами проверить что рекомендовано более рекомендовано, что менее рекомендовано так же вот я вам говорила что есть иЗО, тоже у них правда здесь например, здесь я привела для примера протокол, который они рекомендуют изменили сейчас в 20-м году для сальмонеллы, детекция сальмонеллы для протокола ее как бы определения и не обработки буквально там 16 я не знаю, какая-то валюта сечи то есть это совсем небольшие деньги, которые позволят вам быть на как сказать, up to date так, друзья я вам приготовила цены подарок, как я говорила я сейчас сброшу его в мне, но мне для этого нужно выйти из а давайте мы его, может быть, разошлем вам так, как лучше сделать хорошо сейчас мы решим этот вопрос так, и, друзья, сегодня я заканчиваю мы так сказать сделали обзор основных методов на следующем занятии мы рассмотрим стратегические методы сокращения применения антибиотиков будет ли запись, да, будет запись друзья, вы мне поможете, если скажете насколько был полезен наш сегодняшний вебинар я, конечно, каждый метод особенно не углублялась потому, что у нас на время ограничено но как я, как бы, видел свою задачу, что мы больше обзорная, пока первая лекция это вообще обзорная и, конечно, мы потом сможем с вами углубляться каждую стен сколько угодно, долго во-первых, во-вторых, мы можем от того, что мы сегодня услышали в разные направления мы можем повышать нашу квалификацию в сторону лабораторной диагностики и также в сторону для клинических ветеринарных врачей это тоже будет полезно понять вообще такой общий обзор какие методы существуют какие у них существуют возможности ну и ограничения тоже и, может быть, немножко взгляд вперед, что мы уже сегодня используем и, скорее всего, и завтра вы начнете тоже использовать или уже используете так, друзья, на следующем занятии мы встречаемся 10 сентября в 10 часов татагенез-бактериальных и вирусных инфекций рассмотрим эпитемологические различные аспекты профилактика инфекционных болезней то есть вакцины, как они существуют в принципе антибактериальной терапии спасибо вам большое за внимание было интересно спасибо, что было еще более интересно задавать вопросы задавать вопросы наверняка было что-то не совсем ясно где-то потому что, знаете, когда мы зачастую вообще как родилась вот эта лекция мы когда чем-то много занимаемся нам кажется, многие вещи треебеальные и кажется, ну кому это интересно это же все знают друзья, а потом когда начинают задавать люди вопросы, коллеги понимаешь, ой, оказывается это не так треебеально как кажется поэтому вот наше содержание моих лекций, чьих треебе лекций, оно как раз вот взаимосвязано взаимосвязано, чтобы вам было интересно задайте, пожалуйста, вопрос мы принимаем так, друзья, сейчас у нас мы уже завершаем наше занятие подарочек я вам все-таки дам только я выйду из сейчас секунду, друзья как мне это все перекинуть да, да, вижу да, пожалуйста, спрашивайте Светлана задавайте вопросы сейчас я как-то постараюсь делать перекинуть вам ссылку вы хотите, чтобы мы расослали их да, Светлана спасибо, спасибо мне не хотел слишком поскольку я знаю, что многие из участников еще только начинают свою карьеру в лабораторной диагностике вернее, вот именно диагностики инфекционных болезней да, вы задавали Светлана, я помню катриджный я честно говоря сейчас не очень помню я помню, что это около 16 обычно, знаете, такие спасибо было интересно, спасибо спасибо так, еще да, будет запись я выхожу из полной чтобы я смогла сбросить вам мне нужно выйти из полного показа тибар вы на связи здесь мы можем закончить если мы закончили до четверга секундочку, мне бы хотелось скинуть ссылочку, я приготовила к коллегам подарок, небольшой в качестве анкеты для оценки качества биобезопасности на предприятии как мне выйти из этого стоп-шэру сделать лосо-туду стоп-шэру секундочку как я могу скинуть можно переставить скинуть кажется, мы закончили мы закончили поэтому большое спасибо спасибо и до встречи четверга секунду только не закрывайте я сейчас сделаю я только хочу вот он ссылку сбросить в чат для того, чтобы могли присутствующие могли скачать мой подарок на анкету вот, пожалуйста, друзья, все, можете скачивать большое спасибо Тибор присутствующие задавайте вопросы и таким образом наши встречи будут более интересные спасибо всего хорошего, до свидания, друзья до свидания, всего хорошего