 نیک دین چکہ دیکھنے کے تکنیک جس کم تکرہیںگے وہ ٹیکٹر فورسیز ہے. ٹیکٹر فورسیز میں ہم مکرو مولیکوز کو جہسے پروٹینز ہوئے ایہ ڈین ہیں ایہ ڈارن ہیں اےہ ڈین کو سپریڈینڈ کیلئے استعمال کرتے ہیں. ٹیکٹر فورسیز میں ہم ٹیکٹر کل چارج کو استعمال کرتے ہیں مولیکوز کو ڈیسپرس کرنے کی لی ہے اور ہمارے جو چارج مولیکوز ہیں سی پروٹینز اس میں نگرلوی چارجہ دی because ڈیٹر سیمپل سا سٹرکچر ہے کہ ہم نے پاور سپلی اپلائے کی اور نگیٹوٹس کے درمیان ہمارا بفر سلوشن موجود ہے بفر سلوشن خود بھی چاہجت ہے اور ان ویل کے اندر ہم نے اپنے سیمپل کو دپوزٹ کیا ہے سیمپل کو لوڑ کیا ہے یہ ویلز ہیں تو اس میں اپنے سلوشن بنانے کے بعد پروٹینز کے سلوشن کو ہم اس کے اندر پور کر سکتے ہیں اپنے سلوشن اور مجبسی کیا ہے سلوشن کو ہمارے نارجن کنتیننگ مولکوز بھی دینا ہے اس بیسس پر سلکہ جل کی کمیسٹری مختلف ہو سکتی ہے سارے پروٹین کے مولکوز ایک جیسی افنیٹی سلکہ ساتھ نہیں رکھتے سارے پروٹین کے مولکوز بفر سلوشن کے ساتھ ایک جیسی سالبلیٹی نہیں شو کرتے مختلف pH پر ان کی affinity ان کی movement مختلف ہوگی اس لیے کچھ پیچھر ہ جائیں گے اور کچھ آگے نکلائیں گے اور اس بیسیس پہ ہم سپریشن کر سکتے ہیں یہ ایک مکسر میں سے مختلف قسم کے مولیکیوز بھی آپ کو نظر آ سکتے ہیں کہ اس میں کون کون سکتے ہیں اگر سٹینڈڈ ساتھ اپلائے کیا ہم نے جو کہ ڈیفنٹلی اس فومولیشن میں ہم کرتے ہیں اس سٹینڈڈڈز کے ذریعے ہم مجرمن کر سکتے ہیں یہ کون کون سی پرٹینز ہمارے سامپس کے اندر یا مکسر کے اندر سلوٹ میں موجود تھی لیکٹو فورسس maybe of two ڈائپ سلاب ٹیل سی کی سورت میں جس کو ہم نے اس سے پہلے تصویر کندر اوزرف کیا یا کولم کرموڈگرافی کی سورت میں کبلیری ایک لیکٹو فورسس یعنی یہی سلکہ دپوزٹ ہوگی یا موجود ہوگی ایک کولم کے اندر اور اس میں سے ایک لیکٹسٹی فوست ہم موگمینٹ شو کروائیں گے بیلوسٹی کی چارج مالکیول یعنی پروٹین ایلیکٹک فیلٹ can be assessed with formula بیلوسٹی can be assessed with eq divided by f یعنی بیلوسٹی is directly proportioned to ایلیکٹک فیلٹ apply جتنی زیادہ ایلیکٹک فیلٹ کی strength ہوگی اتنی بیلوسٹی زیادہ ہوگی movement زیادہ ہوگی q is net charge on molecule مالکیول پہ جتنا چارج زیادہ ہوگا اتنی ڈیلیکٹسٹی کی force کی وجہ سے اس کی movement زیادہ ہو جائے گی and f is frictional coefficient a frictional coefficient کا مطلب کہ مالکیول کی shape یا اس کا mass کتنا زیادہ ہے definitely mass to charge ratio کی بات کہ اس میں charge تو زیادہ ہے لیکن mass بھی اگر بہت زیادہ ہے and mass to charge ratio میں mass ایک major factor ہے so mass opposite value create کر رہا ہے velocity اتنی کم ہو جائے گی جتنی جتنا mass زیادہ ہو یا molecule کی shape اگر اس طرح کی ہے کہ وہ کسی اور کے ساتھ drag ہوگا یا اس کے اندر bind ہو جائے گا تو پھر بھی move کرنا مشکل ہو جائے گا stationary phases جلیکٹو force میں استعمال ہو رہیں ہیں وہ starch جل یا page polyacrimide جل agrose جل cellulose acetate اور بازقات paper کو بھی as a medium استعمال کرتے ہیں یہ دو تکنیقز کا یہاں پے تسکرہ کیا گیا ہے جسے polyacrimide جل as a support medium and sodium dodecyl sulphate to d nature protein ناملی ہم پہلے sds کو use کرتے ہیں اس کے ذریعے protein کو d nature کرتے ہیں protein isolated form میں strand کی form میں آجائیں گی اور پھر ان کو separation کرنے کے لیے ہم page یا polyacrimide جل استعمال کریں گے اس طرح iso electrical focusing تکنیق جس میں agrose یا polyacrimide کو استعمال کرتے ہیں ief تکنیق مختلف buffer solution استعمال کر سکتے ہیں اور basically difference وہ pH کا ہے pH 7.0 8.0 یا 8.6 8.5 تو tbe buffer tce buffer tris citrate edta یا tris mellic acid edta buffer tme مختلف کسم کے buffer ہم استعمال کرتے ہیں اور مختلف pH پر ہم ان کو رن کروا کے دیکھتے ہیں identification کرنے کے لیے جسے ہم uv light کو استعمال کر رہے تھے tlc cards پر یا ہم نے کچھ spring agent یا locating agent بھی استعمال کیا تھے تو proteins کی estimation کے لیے کوماسی brilliance blue dye استعمال کرتے ہیں یا mydo black dye استعمال کرتے ہیں یہ کوئی خاص قسم کی is a specific for calcium binding proteins تو ہم transferin استعمال کرتے ہیں یا rubinic acid استعمال کرتے ہیں تو یہ کو specific dyes بھی ہیں جو proteins کو estimate کرنے میں یا ان کو locate کرنے میں helpful ہوں گی histrochemical straining کرتے ہیں aloe enzymes کے ساتھ dna کوگر locate کرنا ہے تو پھر ہم ethidium bromide کو یا silver straining نام لیکی جاتی ہے پہلے ہم fixing اس کو رن کریں گے اس کے بعد straining کریں گے اور پھر d straining کا بھی کوئی method استعمال کریں گے اس کے بعد ہم proteins کو separate out بھی کر سکتے ہیں اسی silicon is a scratch کر کے two dimensional lactophores is یا سی ہم نے 2d technique paper میں and discuss کی تھی کہ پہلے ایک side سے اپنے paper کو رن کریں گے پھر 45 degree angle پر اس کو turn کر کے دبارہ کسی اور solvent کے ساتھ ہم اس کو رن کر کے دیکھ سکتے ہیں تو 2d technique ہم lactophores میں بھی استعمال کرتے ہیں اور اس میں دو مختلف combinations کو یا ایک combination کو استعمال کر سکتے ہیں جیسے IEF اور SDS page کا ہم نے تسکرہ کیا کہ ایک کو IEF جو electricity charges کی basis پر separation کر رہا ہے SDS page جو masses کی value difference ہونے کی وجہ سے separation کر رہا ہے تو ہم ایک مرتبہ ایک side سے ایک technique کو اور دوسری side پر 45 degree پر ہم دوسری technique کو run کر کے مزیز separation یا اور standards کے گئے رن کر کے observe کر سکتے ہیں کتنے مختلف کیسن کی proteins موجود ہوں گی maybe mass to charge ratio میں تو ایک جسی نظر آ رہیں ہوں لیکن جب ہم اس کو charges کی basis پر run کریں تو پھر وہ کچھ difference کر سکتے ہیں تو ہم 2 dimension میں 2 مختلف techniques کا ساہرہ لیتے ہیں