Loading...

Procedures of use ADSC EXTRACTION KIT (Adipose derived stem cells ) by GeneWorld

4,771 views

Loading...

Loading...

Rating is available when the video has been rented.
This feature is not available right now. Please try again later.
Published on Oct 28, 2014

QUY TRÌNH SỬ DỤNG BỘ KIT ADSC EXTRACTION - MICRO KIT

Bước 1: Xử lí sơ bộ mẫu
Cho toàn bộ mỡ (đến 50 gram) vào ống ly tâm.
Chú ý: Nếu mẫu là dạng khối mô mỡ nguyên (không phải dạng mỡ chọc hút) thì cần phải cắt nhuyễn mỡ bằng kéo hoặc dao vô trùng trước khi sử dụng bộ kit này.
Bước 2: Hút 20 mL dung dịch WB2 cho vào chai Super Extract 20, đậy nắp, lắc kĩ
Bước 3: Rửa mẫu bằng dung dịch rửa 1 (Washing buffer 1 – WB1)
- Cho 100 ml WB1 vào ống ly tâm nói trên, lắc đều. Ly tâm ở 1000g trong 5 phút, nhiệt độ phòng. Sau ly tâm loại bỏ dung dịch rửa, giữ lại mô mỡ
- Chú ý: Mô mỡ nổi ở pha trên, dung dịch rửa nằm pha dưới màu đỏ hồng. Để giảm lượng mỡ thất thoát, đặt pipette sâu xuống đáy ống để hút bỏ dung dịch rửa.
- Đối với hệ máy tính thời gian ngay sau khi máy chạy là 6 phút để đạt 1000g, còn đối với hệ máy tính thời gian sau khi đạt 1000g thì điều chỉnh 5 phút
Bước 4: Rửa mẫu bằng dung dịch rửa 2 (Washing buffer 2 – WB2)
- Cho 40 ml WB1 vào ống ly tâm nói trên, lắc đều. Ly tâm ở 1000 g trong 5 phút, nhiệt độ phòng. Sau ly tâm loại bỏ dung dịch rửa, giữ lại mô mỡ.
- Chú ý: Mô mỡ nổi ở pha trên, dung dịch rửa nằm pha dưới màu đỏ hồng. Để giảm lượng mỡ thất thoát, đặt pipette sâu xuống đáy ống để hút bỏ dung dịch rửa.
Bước 5: Phân tách mẫu
- Cho toàn bộ dung dịch Super Extract 20 vào ống ly tâm. Lắc đều, ủ ở 380C – 400C, từ 30 – 45 phút. Lắc đều sau mỗi 5 phút.
Bước 6: Thu nhận tế bào
- Bổ sung vào ống ly tâm dạng phễu 40 ml WB2; lắc kĩ (hoặc vortex). Ly tâm 3000g trong 10 phút, nhiệt độ phòng, loại bỏ dịch nổi và mô mỡ còn thừa, thu cặn tế bào.
- Chú ý: Cuối giai đoạn này, pha trên cùng có màu vàng óng là mỡ, tiếp đến là pha mô mỡ thừa, tiếp đến là pha dung dịch rửa, cuối cùng ở đáy ống ly tâm là tế bào quan tâm.
- Đối với hệ máy tính thời gian ngay sau khi máy chạy là 12 phút để đạt 3000g, còn đối với hệ máy tính thời gian sau khi đạt 3000g thì điều chỉnh 10 phút
Bước 7: Rửa tế bào bằng dung dịch rửa 3 (Washing buffer 3 – WB3)
- Bổ sung 50 mL dung dịch WB3 vào ống ly tâm nói trên; lắc kĩ. Ly tâm 3000g trong 10 phút. Loại bỏ dịch nổi, thu cặn tế bào. (Rửa tế bào lần 1)
- Bổ sung 50 mL dung dịch WB3 vào ống ly tâm nói trên; lắc kĩ. Ly tâm 3000g trong 10 phút. Loại bỏ dịch nổi, thu cặn tế bào. (Rửa tế bào lần 2)

http://geneworld.vn/san-pham/adsc-ext...

Loading...

When autoplay is enabled, a suggested video will automatically play next.

Up next


to add this to Watch Later

Add to

Loading playlists...